Silica gel khử hoạt tính nền – Base deactivated silica gel

2/ Giới thiệu về silica gel trong phân tích HPLC

Phần lớn các phân tích HPLC ngày nay được thực hiện với silica đã được tạo dẫn xuất: các phối tử được liên kết cộng hóa trị với các nhóm silanol để thay đổi tính chất bề mặt, cho phép thực hiện nhiều khả năng phân tích khác nhau. Tuy nhiên, sự tương tác với chất phân tích của pha tĩnh không chỉ được xác định bởi các phối tử mà còn bởi nhiều yếu tố khác, bao gồm số lượng và độ axit của các nhóm silanol không liên kết còn lại. Chúng chịu trách nhiệm về tính chất axit-bazơ của nền silica, góp phần tạo nên tính phân cực tổng thể của bề mặt. Loại và độ axit của chúng đóng vai trò quan trọng đối với độ phân giải và hình dạng peak của các loại hợp chất khác nhau được phân tích.

2/ Nguyên nhân của hiện tượng kéo đuôi peak

Hiện tượng kéo đuôi và hiệu suất thấp đối với hợp chất bazơ và axit có thể xảy ra do sự hiện diện không mong muốn của các tương tác silanol. Với các loại silica HPLC được phát triển trước đây, các nhóm silanol có tính axit khá cao. Kết quả là, ảnh hưởng quan sát thấy lên hình dạng peak đòi hỏi pha động phải chứa bazơ cạnh tranh như triethylamine hoặc axit cạnh tranh như axit axetic. Cả hình dạng peak và hiệu suất của cột đều được cải thiện đáng kể khi sử dụng tác nhân cạnh tranh thích hợp. Những chất phụ gia này phải được dùng ở nồng độ khá cao, thường bằng 1% thể tích của pha động. Điều này có thể có ảnh hưởng xấu đến tuổi thọ của cột cũng như độ tái lập của phương pháp.

3/ Phương pháp khắc phục nhờ silica khử hoạt tính nền

Những khó khăn này đã tạo động lực cho sự phát triển của một loạt các silica sắc ký cải tiến (silica khử hoạt tính nền) giúp phân tích được cả hợp chất base và axit mà không cần các chất phụ gia cạnh tranh trong pha động. Việc xử lý bề mặt silica mang lại sự cải thiện đáng kể về tính đồng nhất của quần thể silanol bề mặt trước giai đoạn tạo dẫn xuất. Kết quả là bề mặt silica liên kết không còn cần đến axit hoặc bazơ cạnh tranh trong pha động để đạt được hình dạng đỉnh chấp nhận được đối với các chất phân tích khó.